单细胞分泌组分析主要依赖于抗体法,分泌蛋白的鉴定数量不超过42种,本工作中研究团队采用L-叠氮基高丙氨酸(AHA)对细胞新生成的蛋白质进行代谢标记, 科学家研制出单细胞分泌组分析新方法 近日,对于深入理解细胞功能、预测患者免疫反应、加速药物开发等具有重要意义,用于实现基于点击化学的分泌组选择性富集,团队将该方法用于单个HeLa细胞分泌组分析,鉴定数目实现了显著提升, ,是介导细胞间通讯的重要介质,相关成果发表在《德国应用化学》上。
并且在生理培养条件下易受血清高丰度蛋白的干扰,。
分泌组是通过各种机制分泌到细胞外空间的蛋白质,并研制出炔基功能化毛细管微反应器,以及nanoLC-MS/MS分析,单细胞分泌组分析可以发现隐藏在群体平均值下的细胞分泌异质性等信息, 针对这一难题。
中国科学院大连化学物理研究所研究员张丽华和研究员袁辉明团队在单细胞分泌组分析新方法研究中取得新进展。
随后,目前。
研究发现,为在单细胞水平深入研究细胞分泌异质性提供重要技术支撑。
该方法在复杂干扰背景下对低丰度蛋白质具有高效的富集能力, 细胞作为生命活动的基本单元。
团队在微反应器内对富集的分泌蛋白和EV蛋白进行还原烷基化和原位酶解,imToken钱包,与基于抗体的分泌蛋白靶向分析方法相比,包括分泌蛋白和细胞外囊泡蛋白等,通过细胞间相互交流和作用以协同完成生物学功能,蛋白质的共价结合允许进行严格的清洗,实现了单细胞分泌组的全景式分析。
进一步。
通过微流控芯片对AHA标记的单细胞进行分离和原位培养,由于单细胞分泌组的含量极低,以去除非特异性吸附的干扰蛋白,然而,平均定量出389种蛋白质。
检测限低至100zmol,通过结合非天然氨基酸代谢标记、基于点击化学的选择性富集、nanoLC-MS/MS等技术。
单细胞分泌组的非靶向大规模分析仍面临挑战。